公司简介 公司简介 新闻中心 新闻中心 产品中心 技术文章 技术文章
 
上海恪敏生物科技有限公司>>> 网站首页 现在是:
产品搜索
关键词:
 
产品分类
抗体
  标记抗体
  进口一抗
  一抗
原装进口Elisa试剂盒
  人Elisa
  人Elisa kit
  牛Elisa试剂盒
  猪Elisa试剂盒
  羊Elisa试剂盒
  豚鼠Elisa试剂盒
  猴Elisa试剂盒
  鸡Elisa试剂盒
  其它Elisa试剂盒
  马Elisa试剂盒
  猫Elisa试剂盒
  绵羊Elisa试剂盒
  兔Elisa试剂盒
  山羊Elisa试剂盒
  犬Elisa试剂盒
  小鼠Elisa试剂盒
  大鼠Elisa试剂盒
  人Elisa试剂盒
国产elisa试剂盒
  猪Elisa试剂盒
  人elisa试剂盒
  小鼠elisa试剂盒
  大鼠elisa试剂盒
进口原装品牌
  gibco
  invitrogen
补充抗体
标准品/对照品
生化试剂
  科研专用培养基
  培养基
  酶类
  抗生素类
AMRESCO
蛇毒试剂
化学试剂
  标准滴定溶液
  PH缓冲液
  指示剂
环保设备
进口原装Elisa试剂盒
  R&D
  BD-PMG
  Abcam
  Cell Biolabs
  CST
  genway
  ExcellBio
  cygnus
  CBL
  Pierce
Elisa试剂盒
  大鼠Elisa试剂盒
  鱼Elisa试剂盒
  鸭Elisa试剂盒
  植物Elisa试剂盒
  人Elisa试剂盒
  技术文章
ELISA检测样品的处理方法
点击次数:3252 发布时间:2015-08-19

通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的*步,下面简单介绍一下不同类型的样本的处理方法。

1  血清

血清是zui常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。

用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃一个晚上,使血清析出。(将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血清更大程度的析出。)4 1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。

2  血浆

用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30min4 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读试剂盒说明书,检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。

3  细胞培养上清

取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

4  细胞裂解液

1  吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。

2  收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。

3  加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。

4  将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。

5  4 10000×g 离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

5、组织匀浆液

1  将组织样本用PBS (0.01锚点锚点M, PH 7.4冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。

2  将组织块称重,记录后剪碎,碎块应尽量小,便于匀浆得更充分

3  将组织按一定的比例加入预冷的PBS(临用前加入蛋白酶抑制剂)匀浆,匀浆时置于冰上或冰浴中。(通常按组织重量:PBS体积=1:9的比例匀浆,例如1g的组织样本对应9mLPBS,具体体积可根据实验需要适当调整,检测后计算样品浓度时应乘以相应的稀释倍数)

4  吸取匀浆液到离心管,4 5000×g 离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

6  尿液、唾液等其他液体生物样本

1000×g离心20min,取上清即可检测。

总的来说,因为ELISA只能检测可溶性蛋白的含量,所以应保证所有样本均为澄清的液体,沉淀或悬浮物都应离心去除。

为了保证检测的准确性,保存于-20℃或-80℃的样本在1~6个月内检测;4℃保存的样本应在1周内进行检测。

另外,还应保证样本不含NaN3,因为NaN3会抑制HRP的活性,从而导致假阴性的结果。

ELISA检测样品的处理方法
我司elisa试剂盒在Cell Research发论文
ELISA原理与分类
复旦教授为我国二代转基因棉花研究做出重要贡献
一种抗体或可“通吃”所有肿瘤细胞
新的成像工具揭示乳腺组织中的细微变化
中生集团研发中心落户光谷 提升武汉生物医药实力
抗生素药物需求现状及产业格局分析
德国科研人员利用表观遗传学方法判断肠癌化疗效果
胃粘膜中一种糖链缺失可致胃癌
公司名称:上海恪敏生物科技有限公司
电 话:18021003406
传 真:
联 系 人:王羽
手 机:18021003406
详细地址:上海闵行区景联路439号
邮 编:201108
邮 箱:1914109725@qq.com
网 站:www.bohuasw.com

主营产品:

首页 企业简介 新闻中心 产品展示 产品目录 技术文章 给我留言 联系我们

上海恪敏生物科技有限公司 版权所有 总访问量:387869 地址:上海闵行区景联路439号 邮编:201108
电话:18021003406 传真: 手机:18021003406 联系人:王羽 邮箱:1914109725@qq.com
GoogleSitemap 管理登陆 ICP备案号:

化工仪器网

推荐收藏该企业网站
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站