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重组乙肝病毒核心抗原(rHBcAg)、 重组乙肝病毒e抗原(rHBeAg)制备完成
点击次数:4497 更新时间:2012-07-10
 

在我国,乙肝病毒感染及带病毒者约占人群的十分之一,乙肝病毒可形成慢性感染,是肝癌和肝硬化的主要原因。乙肝病毒的外壳由内质网膜及表面抗原覆盖,它的里面含病毒的核壳体,由病毒的核心抗原及病毒DNA组成。核心抗原由两个单体组成,每一个单体含183个氨基酸,前149个氨基酸与形成核心抗原的二联体有关,后34个氨基酸主要为碱性氨基酸,与病毒DNA直接结合。
    
乙肝病毒核心抗原(rHBcAg)主要存在于病毒颗粒内,在急性感染的早期即消失,抗核心抗原抗体产生于急性病毒感染,也见于带病毒者,或康复期的病人。IgM抗核心抗体阳性表示急性感染,IgG抗核心抗体阳性表示曾有感染或慢性感染。
    rHBcAg的应用:rHBcAg由大肠杆菌表达,含183个氨基酸,分子量为23kDa。
    应用:可用于临床酶联免疫检测及蛋白质电泳固相酶联免疫检测。
    纯化方法及纯度:利用拄层析技术,12% SDS-PAGE检测纯度大于95%。
    保存方法和稳定性:存放在负20度,有效期两年。
    核心抗原溶液:含2M尿素,pH 7.40的50mM 磷酸盐。


    
乙型肝炎e抗原(rHBeAg)是由HBVDNAC基因区编码的一种非颗粒性的分泌型核壳蛋白,临床上将其作为判断HBV活动性复制的指标之一。HBeAg是重要的生物原材料,广泛用于HBV感染者血清学检测的相关诊断用品的制备,乙肝病毒的外壳由来自人体的内质网膜及表面抗原覆盖,它的里面含病毒的核壳体,它由病毒的核心抗原及病毒DNA组成。核心抗原基因可产生两个不同的蛋白,一个是21.5-kDa的蛋白,含183个氨基酸可与病毒DNA结合,称核心抗原;另一个为核心抗原的前体,该蛋白除了含与核心抗原相同的183个氨基酸外,在其起始处还有一段含29个氨基酸的多肽,核心抗原前体在内质网内修饰后,其N-端只保留了10个氨基酸,而C-端则去掉了34个与病毒DNA结合的碱性氨基酸,zui后e抗原以这种形式被分泌出去。
    核心抗原主要存在于病毒颗粒内,在急性感染的早期即消失,抗核心抗原抗体产生于急性病毒感染,也见于带病毒者,或康复期的病人。IgM抗核心抗体阳性表示急性感染,IgG抗核心抗体阳性表示曾有感染或慢性感染。
    如果血清e抗原阳性,表明该病毒有传染他人的危险,检测e抗原还可指导治疗,e抗原的消失表明治疗的有效性。如果病人的抗e抗原阳性,则表明病人急性感染阶段的结束,病毒的传染性大大地降低。     rHBeAg的表达及应用:rHBeAg由大肠杆菌表达,在起始密码子前含有10个氨基酸,后面和含有149个氨基酸的多肽相连接,分子量为18 kDa。
    该重组蛋白可用于临床酶联免疫检测及蛋白质电泳固相酶联免疫检测。
    纯化方法及纯度:利用拄层析技术,12% SDS-PAGE检测纯度大于95%。
    保存方法和稳定性:存放在负20度,有效期两年。
    核心抗原溶液:含2M尿素,pH 7.40的50mM 磷酸盐。

 
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