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NEXT 胶™ 电泳缓冲液//NEXT GEL RUNNING BUFFER 20X/M259-50 |
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上海博华是一家专业试剂供应商,销售众多ABI、invitrogen、R&D、sigma、AMRESCO等,为您提供AMRESCO优质进口原装的NEXT 胶™ 电泳缓冲液//NEXT GEL RUNNING BUFFER 20X/M259-500ML,现货供应,欢迎订购! |
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NEXT 胶™ 电泳缓冲液//NEXT GEL RUNNING BUFFER 20X/M259-50的详细资料: |
NEXT 胶™ 电泳缓冲液//NEXT GEL RUNNING BUFFER 20X/M259-500MLelisa洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响zui后的酶标仪读数。工作标准品(对照品)使用中的问题。工作标准品(对照品)虽经有关部门认可,但要求有标化日期、复标日期、贮存条件、使用等相关文件规定,并做好相应记录,但有些企业未能达到以上要求。大多数生产企业未规定复标期限和贮存条件,一次标定,用完为止,其使用期限也未进行验证;有些企业记录不完整,对使用工作标准品(对照品)不能溯源。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在 IC50时的浓度,并按下列公式计算交叉反应率。elisa试剂盒组成及试剂配制:1. 酶联板:一块(96孔) 2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,600 pg/ml,将其稀释为400 pg/ml后,再做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别稀释成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。如配制200 pg/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。3. 样品稀释液:1×20ml。4. 检测稀释液A:1×10ml。5. 检测稀释液B:1×10ml。6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 11. 覆膜:5张12. 使用说明书:1份 方法二 用于检测未知抗体的间接法: 用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。elisa实验步骤:1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后立即进行检测。
NEXT 胶™ 电泳缓冲液
NEXT GEL RUNNING BUFFER 20X M259-500ML 蛋白组学级
500ML RT No IRRITANT / SENSITIZER
12352200 4 years Protein Electrophoresis
PROTEOMICS GRADE
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0ML相关知识>>>> 选用有证标准物质与所用的分析测量方法密切相关。有证标准物质的不均匀程度取决于检验均匀性时所用方法的重复性。当用户使用该有证标准物质评价一个有更好重复性的方法时,有可能会发现物质的不均匀性。在这种情况下,用有证标准物质评价这个方法,其评价基础应有一定问题。ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牵9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。当然,如果有证标准物质供应充足或来源充足且价格低廉,还是使用有证标准物质而不采用其他类型的工作标准,因为这样可以提高测量结果的可信度。通过表达蛋白作免疫原制备单抗,可以对获得的单克隆细胞株群进行筛选,可以获得能满足不同抗体应用要求的单抗(即获得多株单克隆细胞株,可以分别或者同时满足不同抗体应用要求)。抗原一般是指进入机体内的外来物质,如细菌、病毒、花粉等;抗原也可以是不同物种间的物质,如马的血清进入兔子的体内,马血清中的许多蛋白质就成为兔子的抗原物质;将抗原与佐剂混合的过程称为乳化。乳化的方法很多,可采用研钵乳化;可直接在旋涡振荡器上乳化;可用组织捣碎器乳化。 关键词:0ML |
产品相关关键字: NEXT 胶™ 电泳缓冲液 NEXT GEL RUNNING BUFFER 20X M259-50 |
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